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9-15

肝星形細(xì)胞的活化是肝纖維化發(fā)生的中心環(huán)節(jié)，其調(diào)控機(jī)制涉及多條信號(hào)通路的復(fù)雜交互。近年來(lái)，針對(duì)肝星形細(xì)胞活化通路的解析不斷深入，為抗纖維化藥物篩選提供了豐富的靶點(diǎn)資源，推動(dòng)了從基礎(chǔ)機(jī)制到臨床轉(zhuǎn)化的全鏈條研究。核心調(diào)控通路方面，肝星形細(xì)胞活化受多種信號(hào)級(jí)聯(lián)的精密調(diào)控。SHP2/ERK通路是備受關(guān)注的調(diào)控軸，該通路通過(guò)影響活化標(biāo)志物的表達(dá)水平參與肝星形細(xì)胞的表型轉(zhuǎn)...

9-13

U87MG是膠質(zhì)母細(xì)胞瘤研究中廣泛使用的人腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞系，在腫瘤生物學(xué)、藥物篩選和放射生物學(xué)等領(lǐng)域具有較高的應(yīng)用頻率。其體外培養(yǎng)的標(biāo)準(zhǔn)化操作是保證實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)可重復(fù)性和細(xì)胞生物學(xué)功能完整性的基礎(chǔ)。以下從細(xì)胞培養(yǎng)管理角度，系統(tǒng)闡述人腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞系U87MG在復(fù)蘇、傳代、凍存及質(zhì)量控制各階段的操作要點(diǎn)。細(xì)胞復(fù)蘇的操作流程U87MG細(xì)胞從液氮中取出后，應(yīng)迅速轉(zhuǎn)移至37...

9-10

做細(xì)胞培養(yǎng)的，誰(shuí)沒在復(fù)蘇上翻過(guò)車？小心翼翼從液氮罐里拎出凍存管，水浴、離心、鋪瓶，整套動(dòng)作看著標(biāo)準(zhǔn)得不行，結(jié)果第二天鏡下一看——半瓶細(xì)胞飄在上面，貼壁的很少，形態(tài)還皺巴巴的。很多人第一反應(yīng)就是甩鍋：這凍存細(xì)胞質(zhì)量不行。但做久了就懂：復(fù)蘇存活率，三分看凍存，七分看操作。同樣一管細(xì)胞，有的人復(fù)蘇活率能到90%，有的人只能活一半，差就差在那些不起眼的細(xì)節(jié)里。從凍存...

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人乳腺癌細(xì)胞MCF7是乳腺癌研究中具代表性的細(xì)胞系之一，源自一名69歲白人女性的乳腺轉(zhuǎn)移性腺癌，在腫瘤學(xué)、內(nèi)分泌學(xué)和藥物研發(fā)領(lǐng)域具有廣泛的應(yīng)用基礎(chǔ)。MCF7保留著雌激素受體陽(yáng)性的表達(dá)特征，使其成為激素依賴性乳腺癌研究的體外模型。理解其生物學(xué)特性及其在實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)中的原理，有助于在研究中合理使用這一工具。MCF7的激素反應(yīng)性及其分子基礎(chǔ)MCF7細(xì)胞表達(dá)功能性雌激素...

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人皮膚成纖維細(xì)胞（HSF）是皮膚生物學(xué)、傷口愈合、抗衰老研究和再生醫(yī)學(xué)領(lǐng)域常用的原代細(xì)胞模型之一。它來(lái)源于人體真皮組織，在體外能夠貼壁生長(zhǎng)、合成細(xì)胞外基質(zhì)成分（如膠原蛋白、彈性蛋白、纖連蛋白），對(duì)機(jī)械張力、紫外線輻射和細(xì)胞因子刺激響應(yīng)敏感。HSF是貼壁依賴性細(xì)胞，體外培養(yǎng)需要適宜的表面支持。操作中需要注意無(wú)菌、溫度和操作手法。下面從操作者角度，梳理HSF日常...

9-3

做細(xì)胞培養(yǎng)的人，大概率都遇過(guò)這種「卡殼」時(shí)刻：傳代都三四天了，湊到顯微鏡前一看——細(xì)胞好好貼在瓶底，沒死，也沒污染，形態(tài)看著也沒大毛病，可密度跟剛種下去的時(shí)幾乎沒差，像被誰(shuí)按了暫停鍵一樣。細(xì)胞長(zhǎng)得慢，有時(shí)候比直接死掉還磨人。死了，大不了扔了重復(fù)蘇，干脆利落。長(zhǎng)得慢才是真煎熬：每天去看，它都不增不減、不死不活，你總覺得明天說(shuō)不定就長(zhǎng)起來(lái)了，結(jié)果一周過(guò)去，還是那...

8-20

人肝星形細(xì)胞（如LX-2）是研究肝纖維化的經(jīng)典模型，但其對(duì)培養(yǎng)環(huán)境高度敏感，極易出現(xiàn)增殖緩慢、活力下降或活化表型丟失（失去α-SMA表達(dá)）。排查應(yīng)遵循“先排查培養(yǎng)環(huán)境，再審視操作細(xì)節(jié)”的遞進(jìn)邏輯。一、培養(yǎng)環(huán)境與試劑排查培養(yǎng)箱的溫度與CO?濃度波動(dòng)是首先需要確認(rèn)的因素。溫度應(yīng)穩(wěn)定在37℃，CO?濃度需精確維持5%以保障培養(yǎng)基pH緩沖體系的穩(wěn)定。同時(shí)檢查培養(yǎng)基（...